HBV X基因-HCV C基因cDNA融合基因真核表达载体的构建及其表达

• 作者: 刘为纹 刘重阳 王军 陈东风
• 来源期刊: 胃肠病学和肝病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒 X蛋白 病毒核心蛋白 肝细胞癌
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 419-421
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 2332字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5709.2003.05.004

摘要

目的构建HBVX-HCVC融合基因真核表达载体,并获得稳定表达该基因的HepG2细胞株.方法双酶切质粒pXT1-X,得到完整的HBV X基因片段后,将其插入到质粒PBK-CMV和PBK-HCV C的相应酶切位点,得到重组质粒PBK-X和PBK-X-C;再将质粒RBK-CMV、PBK-X、PBK-HCV C和PBK-X-C分别导入肝癌细胞株HepG2中,G418筛选,RT-PCR、蛋白印迹鉴定HBV X和HCV C蛋白表达.结果质粒PBK-CMV、PBK-X、PBK-HCV C和PBK-X-C在HepG2细胞中有稳定表达.结论成功构建HBV X-HCVC融合基因真核表达载体,并获得稳定表达该基因的HepG2细胞株.