prk基因非融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 冯振卿 徐玮 李玉华 江千里 江汕 管晓虹
• 来源期刊: 南京医科大学学报(自然科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: prk基因 激酶 基因表达 非融合蛋白
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 341-343
• 页数: 3页
• 分类号: R378.2+1|Q74
• 字数: 2273字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2003.04.015

摘要

目的:构建prk基因的非融合表达载体,并诱导表达.方法:PCR扩增并回收prk基因片段,将其与亚克隆载体pMDl8-T重组,通过蓝/白斑筛选、酶谱分析和序列测定鉴定出重组质粒,然后从该重组质粒上切下prk基因片段,再克隆至非融合表达载体pBV220中,酶谱分析鉴定出正向重组质粒,诱导含有正向重组质粒的宿主菌表达蛋白,提取全菌总蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析.结果:成功构建并筛选出pBV220正向重组质粒,经热诱导表达,得到一可溶性的相对分子质量为65 ku的重组蛋白.结论:pBV220-prk表达载体的成功构建和表达,说明扩增所得的基因具有正确的阅读框架,使获得天然Prk蛋白成为可能,为进一步研究prk基因的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯振卿	南京医科大学病理学教研室	140	833	14.0	21.0
2	管晓虹	南京医科大学医学分子生物学研究所	58	333	10.0	15.0
3	李玉华	南京医科大学病理学教研室	33	205	9.0	13.0
4	江汕	南京医科大学病理学教研室	13	130	5.0	11.0
5	徐玮	南京医科大学病理学教研室	18	106	6.0	9.0
6	江千里	上海长海医院血液科	1	3	1.0	1.0