利用新型表达载体一步获得HIV-1核壳蛋白p24纯品

• 作者: 张晓光 曾毅 滕智平 王自春 袁静明 郭秀婵
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人免疫缺陷病毒1型 核壳蛋白 基因表达 纯化
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 375-379
• 页数: 5页
• 分类号: R37
• 字数: 4186字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2003.05.020

摘要

目的利用新型原核表达载体获得人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)核壳蛋白p24纯品. 方法采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增出HIV-1 HXB2株gag开放阅读框架的内壳蛋白p24的基因片段,将目的基因片段插入到新型表达载体pTXB中构建成重组表达质粒pTXB-p24.表达产物的纯品通过几丁质珠(chitin beads)的亲和与柱上DTT的剪切而得到.用SDS-PAGE和HPLC分析所得纯品的大小和纯度,用Western blot和胶体金实验检测其抗原性. 结果构建的重组表达质粒pTXB-p24经IPTG诱导得到C端融合Intein-CBD的p24蛋白,该蛋白通过几丁质珠(chitin beads)的亲和与柱上DTT的剪切得到纯化的非融合的p24重组蛋白.HPLC分析表明其纯度可达96%,胶体金结果显示纯化的p24可与HIV-1阳性患者的血清反应,具良好的抗原性. 结论利用新型原核表达载体可一步获得纯度为96%的非融合p24抗原纯品,为大规模生产该蛋白提供了可靠的保证.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王自春	中国预防医学科学院病毒所	1	1	1.0	1.0
2	滕智平	中国预防医学科学院病毒所	2	2	1.0	1.0
3	张晓光	中国预防医学科学院病毒所	1	1	1.0	1.0
4	郭秀婵	中国预防医学科学院病毒所	10	89	6.0	9.0
5	袁静明		34	203	8.0	12.0
6	曾毅	中国预防医学科学院病毒所	43	368	12.0	17.0