猪肌生成抑制素C末端80氨基酸编码基因的合成及其原核表达

• 作者: 吕文发 张永亮 张英霞 李树伟 梁冠生 欧阳红生
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪肌生成抑制素 基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 265-267
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 1799字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2003.03.020

摘要

将猪肌生成抑制素编码序列下游883～1 126 bp按大肠杆菌嗜好密码子进行优化,将优化后序列双链分成12个单链片段(F1、F2、F3、R6、R5、R4、F4、F5、F6、R3、R2、R1),采用化学合成方法合成,每对相邻互补片段之间有20 bp序列交叉重叠.F1长38 bp,R1长36 bp,其他片段均40bp长,F1和R1片段两端分别加上限制性内切酶Nco I和Xho I的识别位点序列.经PCR扩增出254 bp片段,该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109感受态细胞,所得阳性克隆进行测序分析,得到的克隆序列与设计的序列完全一致,表明成功地获得了猪肌生成抑制素下游编码序列克隆载体.从阳性细菌中提取质粒,经Nc0 I和Xho I酶切,回收254 bp目的片段,定向克隆到pET28a中,转化DH5.受体菌,提取质粒,再转化到BL21(DE3)中,成功筛选出阳性克隆.阳性菌经IPTG诱导,通过SDS PAGE,检测出猪肌生成抑制素的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张永亮	解放军军需大学军事兽医系	16	143	7.0	11.0
2	欧阳红生	解放军军需大学军事兽医系	46	805	10.0	27.0
3	吕文发	吉林农业大学动物科技学院	88	351	9.0	14.0
4	梁冠生	解放军军需大学军事兽医系	7	44	5.0	6.0
5	李树伟	解放军军需大学军事兽医系	2	11	2.0	2.0
6	张英霞	解放军军需大学军事兽医系	2	11	2.0	2.0