细粒棘球蚴Eg95全长基因的克隆与在甲醇酵母中的表达

• 作者: 余新炳 徐劲 胡旭初 陆家海 陈守义
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细粒棘球蚴 Eg95全长基因 甲醇酵母
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 28-31,95
• 页数: 5页
• 分类号: R383.3
• 字数: 3454字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2003.01.010

摘要

目的了解我国新疆细粒棘球绦虫表膜蛋白Eg95的全长基因结构及尝试其在甲醇酵母中表达.方法PCR从细粒棘球蚴头节DNA中扩增含有全长编码区序列(cds)的基因,克隆到T载体中测序.再亚克隆到pMETαA中,构建不带6个组氨酸标签的重组质粒,转化甲醇酵母,分析Eg95全长基因的表达.结果成功扩增了细粒棘球蚴绦虫1262bp的Eg95全长基因,含有两个内含子,外显子核苷酸序列与Genbank中细粒棘球绦虫Eg95 cds完全一致,但扩增的基因与已知的其他Eg95全长基因存在差别.1μg重组质粒的表达盒转化甲醇酵母PMD16,获得了Eg95基因重组工程酵母10个,其中非同源重组子3个.甲醇诱导非同源重组酵母特异表达出了分子量约为17kDa与Eg95cds编码蛋白接近的蛋白.酵母培养上清SDS-PAGE未见该蛋白条带出现,表达的蛋白可能主要位于酵母表面.结论克隆到Eg95属于一个基因家族的成员之一,其基因编码区高度保守,含有内含子的全长基因同样可在酵母中进行表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	201	1352	17.0	28.0
2	徐劲	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	104	568	13.0	17.0
3	胡旭初	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	108	574	13.0	17.0
4	陈守义	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	31	211	8.0	13.0
5	陆家海	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	97	466	12.0	14.0