犬瘟热病毒OP株囊膜糖蛋白F基因片段表达产物的免疫原性

• 作者: 刘岳龙 吉荣 崔治中 徐向明 李厚达 杨玲 殷俊 秦爱建 金文杰
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 犬瘟热病毒 F基因 表达 间接免疫荧光试验 中和试验
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 231-233
• 页数: 3页
• 分类号: S852.655|Q78
• 字数: 3251字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2003.03.008

摘要

根据已发表的犬瘟热病毒OP株核酸序列设计2对引物,以犬瘟热病毒OP株感染Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板,应用RT-PCR扩增出F基因的769、832 bp片段.将PCR产物按正确的阅读框架定向克隆进pGEX-6p-1载体中谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因的下游,再将重组质粒转化入宿主菌BL21中,在37℃1.0 mmol/LPTG诱导下,F基因2个片段获得了良好的表达.表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,确定所表达的融合多肽大小分别为54 000、56 000.将表达产物回收后混合免疫小鼠,IFA显示,免疫小鼠血清能与病毒感染细胞呈现特异反应,并表现出1:16的中和抗体活性,表明体外表达的F多肽保留了天然蛋白的部分抗原性.