EBV-LMP1基因杆状病毒表达载体的构建及其在昆虫细胞中的表达

• 作者: 吴淑华 杨英 林勇平 汤郡 马桂璋
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: LMP1 杆状病毒表达系统 昆虫细胞
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 142-145
• 页数: 4页
• 分类号: R739.63
• 字数: 3717字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2003.02.006

摘要

目的构建EBV-LMP1基因的杆状病毒重组供体质粒,包装重组LMP1的杆状病毒,感染昆虫细胞进行表达.方法先将已克隆的LMP1 cDNA与线性化的pFASTBAcHTb进行连接,使pFASTBACHTb-LMP1与DH10BAc感受菌进行转座重组,利用抗性及蓝白斑筛选重组Bacmid/LMP1克隆,提取Bacmid/LMP1转染昆虫细胞Sf9包装杆状病毒,利用病毒感染Sf9细胞进行蛋白表达,通过免疫荧光、SDS-PAGE和Western-blot检测表达情况.结果获得了重组LMP1的杆状病毒,细胞能表达出与LMP1单抗结合的蛋白,分子量为63kDa左右,细胞可直接分泌LMP1蛋白至上清.结论LMP1能在昆虫细胞中获得良好表达,为研究肿瘤疫苗及LMP1在EBV致瘤分子机理中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林勇平	广州医学院微生物与免疫教研室	52	264	10.0	14.0
5	马桂璋	广州医学院微生物与免疫教研室	16	73	4.0	7.0
6	杨英	广州医学院微生物与免疫教研室	12	48	4.0	6.0
7	汤郡	广州医学院微生物与免疫教研室	9	65	4.0	8.0
8	吴淑华		2	6	2.0	2.0