登革2型病毒重组E蛋白的生物学特性分析

• 作者: 方丹云 曾祥凤 江丽芳 郭辉玉 魏惠永
• 来源期刊: 中山大学学报(医学科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 登革热病毒 膜糖蛋白类 重组蛋白质 /分离与纯化 抗体
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 214-216,220
• 页数: 4页
• 分类号: R373.3
• 字数: 2274字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2003.03.006

摘要

[目的]检测重组 D2V全长 E蛋白纯化后的免疫反应性与抗原性,为其亚单位疫苗研制奠定基础.[方法]酵母表达上清超滤浓缩后用金属螯合亲和层析(MCAC)法过柱,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术观察蛋白条带.将纯化蛋白与组氨酸抗体、 D2V E单抗进行斑点印迹和蛋白印迹,以确定纯化物是否为含组氨酸尾的 D2V E融合蛋白,并用 ELISA检测纯化 E蛋白与不同 DV抗体的结合反应.用纯化的重组 D2V E蛋白免疫小鼠后测定其产生的抗体类型与滴度,以分析其抗原性.[结果]表达产物经 MCAC柱纯化获得单一的相对分子质量为 69× 103的蛋白,组氨酸抗体与 D2V E单抗的印迹试验证实该条带就是含多聚组氨酸尾型特异的重组 E蛋白(rEgp) , ELISA显示纯化的 rEgp保留有免疫反应性及型特异性,内糖苷酶 H消化证实其含有 N联高甘露糖残基.接种 rEgp可诱生针对 D2V抗原与重组 E蛋白的高效抗体.[结论]纯化的 D2V全长 E蛋白保留其免疫原性和免疫反应性,并具有型特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方丹云	中山大学中山医学院微生物学教研室	35	121	6.0	8.0
2	江丽芳	中山大学中山医学院微生物学教研室	68	274	7.0	12.0
3	郭辉玉	中山大学中山医学院微生物学教研室	21	100	6.0	9.0
4	魏惠永	中山大学中山医学院微生物学教研室	4	6	2.0	2.0
8	曾祥凤	中山大学中山医学院微生物学教研室	6	9	2.0	2.0