登革2型病毒包膜蛋白在毕赤酵母中的表达和病毒样颗粒的组装

• 作者: 刘岩 刘文权 方丹云 江丽芳 江汉宁 汤云霞
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 包膜蛋白 毕赤酵母 病毒样颗粒
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 376-380
• 分类号: R373.3
• 字数: 5085字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.05.003

摘要

目的 在组成型的毕赤酵母系统中表达登革2型病毒包膜蛋白E和前膜蛋白prM,并研究病毒样颗粒在酵母细胞中的组装特性.方法 以登革2型病毒ZS0I/01株mRNA为模板,扩增编码prM/E蛋白的基因.将目的 基因克隆至表达载体pGAPZaA的多克隆位点,并转化毕赤酵母GS115.经Zeocin抗生素筛选和PCR鉴定后获得酵母菌重组克隆,并进行表达和鉴定.结果 成功克隆登革2型病毒prM/E基因,SDS-PAGE和Western blot检测表明包膜蛋白E在组成型的毕赤酵母系统中得到高水平表达;利用透射电镜在重组酵母胞浆内检测到30-50 nm的登革2型的病毒样颗粒,并发现类似登革病毒感染的双层膜结构;免疫电镜结果证实重组病毒样颗粒可以与抗登革2型病毒血清反应,具有免疫反应性.结论 成功的建立了组成型表达登革2型病毒样颗粒的毕赤酵母系统,为登革病毒样颗粒疫苗的制备奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方丹云	中山大学中山医学院微生物学教研室	35	121	6.0	8.0
2	江丽芳	中山大学中山医学院微生物学教研室	68	274	7.0	12.0
3	刘岩	中山大学中山医学院微生物学教研室	9	33	4.0	5.0
4	刘文权	温州医学院基础医学院	2	4	1.0	2.0
5	汤云霞	中山大学中山医学院微生物学教研室	4	11	2.0	3.0
6	江汉宁	中山大学中山医学院微生物学教研室	1	4	1.0	1.0