人纤溶酶原Kringle 1-4.5结构域的表达及活性鉴定

• 作者: 叶勤 周庆玮 徐韧 李载平 甘人宝 谢静莉 辛利
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: K1-4.5 毕赤酵母 表达 纯化 生物活性
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 138-142
• 页数: 5页
• 分类号: Q5
• 语种: 英文

摘要

利用RT-PCR的方法从人肝癌细胞株HepG2细胞内获得了编码人纤溶酶原(hPlasminogen) 的Kringle 1到4及部分Kringle 5结构域 (简称K1-4.5)的cDNA, 将其克隆到表达载体pHIL-S1中. 将重组载体pHIL-K 1-4.5转化毕赤酵母GS115, 得到的重组菌株用甲醇进行诱导表达, 并利用赖氨酸亲和柱纯化重组蛋白质, 得到的蛋白质纯度大于95%. 重组蛋白质能特异性地按剂量依赖的方式抑制碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)刺激的牛主动脉内皮细胞(BAEC)的增殖, 浓度为2 mg/L达到最大抑制效果的50%; K1-4.5还能抑制bFGF引起的BAEC的迁移, 作用浓度为1 mg/L时对BAEC迁移的抑制率为40%.