甲状旁腺功能低下症基因治疗中重组表达体系pCKM-mPTH质粒的构建与表达

• 作者: 朱易凡 王劲松 王深明
• 来源期刊: 中国实用外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲状旁腺功能低下症 基因重组 基因治疗
• 年，卷（期）: 2003,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 671-673
• 页数: 4页
• 分类号: R6
• 字数: 2726字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1005-2208.2003.11.015

摘要

目的研究构建重组表达体系pCKM-mPTH质粒,寻找甲状旁腺功能低下症的基因治疗途径. 方法采用重叠聚合酶链反应(PCR)法、巢式PCR法及粘端连接法构建pCKM-mPTH质粒,以脂质体转染骨骼肌细胞,用β-actin半定量和放免法分别测定其在细胞内外的表达. 结果嵌合基因 pCKM-mPTH质粒测序完全符合已知核苷酸序列,并完成定点突变,转染骨骼肌细胞后,β-actin半定量法测得mPTH在细胞内成功高效表达,放免法测得24h克隆细胞培养液中甲状旁腺激素蛋白的含量为26.37ng/L. 结论成功构建了SD(Sprague Dawley)大鼠重组基因表达体系pCKM-mPTH质粒,并证实其在骨骼肌细胞中有高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王深明	中山大学附属第一医院甲状腺外科	232	1598	20.0	29.0
2	朱易凡	中山大学附属第一医院甲状腺外科	51	197	8.0	11.0
3	王劲松	中山大学附属第一医院甲状腺外科	34	205	7.0	13.0