人EGFR胞外段原核表达及免疫原性研究

• 作者: 刘健 卢铀 田聆 胡兵 赵霞 魏于全
• 来源期刊: 华西医学
• 学科: 医学
• 关键词: EGFR 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-6
• 页数: 2页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2040字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-0179.2003.01.004

摘要

目的:研究人EGFR胞外段在原核本系的表达、纯化条件以及对小鼠的免疫原性.方法:以既往构建包含人EGFR胞外段基因的表达质粒为基础,采用基因工程方法构建pET原核表达载体.在大肠杆菌中表达目的蛋白,表达蛋白在变性条件下,通过Ni2+柱亲和层析纯化以包涵体形式存在的His-Tag融合蛋白,SDS-PAGE检测其纯度.去余His-Tag的纯化蛋白在梯度尿素中透析复性.以复性蛋白免疫小鼠获得抗血清,western blotting及流式细胞仪检测特异抗体的存在.结论:通过限制酶切分析及测序鉴定表明获得了人EGFR胞外段基因的pET原核表达载体,SDS-PAGE分析表明在IPTG诱导下可以表达90Kd目的蛋白其纯度大于95%,所产生抗体可以识别复性蛋白及表达于A549细胞上的EGFR.提示在大肠杆菌中表达的人EGFR胞外段重组蛋白具有免疫原性,可以进一步用于EGFR免疫研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢铀	四川大学华西医院教育部人类疾病生物治疗重点实验室与肿瘤中心	29	326	8.0	17.0
2	胡兵	四川大学华西医院教育部人类疾病生物治疗重点实验室与肿瘤中心	124	540	11.0	16.0
3	赵霞		57	318	9.0	17.0
4	田聆	四川大学华西医院教育部人类疾病生物治疗重点实验室与肿瘤中心	25	216	6.0	14.0
5	刘健	四川大学华西医院教育部人类疾病生物治疗重点实验室与肿瘤中心	13	109	4.0	10.0