血红素加氧酶在大肠杆菌中稳定表达的氨基酸范围的研究

• 作者: 刘明 周虹 滕悦秋 王志刚 王秀宏
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 血红素加氧酶 大肠杆菌 缺失的变异型 催化活性
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 212-215
• 页数: 4页
• 分类号: Q55
• 字数: 3255字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2004.04.003

摘要

目的确定在原核细胞中呈可溶性稳定表达但不改变活性的血红素加氧酶氨基酸范围.方法应用PCR技术构建了鼠血红素加氧酶-1(RHO-1)和人血红素加氧酶-2(HHO-2)的 N端和C端部分氨基酸缺失的变异型RHO-1和HHO-2,将它们在大肠杆菌中表达并纯化后通过光谱扫描法测定变异型酶与野生型酶的催化活性,确定RHO-1和HHO-2中的N端和C端缺失不影响其可溶性表达及催化活性的氨基酸范围.结果△N8RHO-1(N端缺失8个氨基酸的RHO-1)和△C70 RHO-1在大肠杆菌中表达为可溶性蛋白且催化活性与RHO-1野生型相同,△N20HHO-2和△C77 HHO-2在大肠杆菌中也表达为可溶性蛋白且催化活性与HHO-2野生型相同,而△N9RHO-1和△C75RHO-1在大肠杆菌中表达为包涵体.结论 RHO-1和HHO-2的N端和C端部分氨基酸缺失的突变型酶对其催化功能没有影响,并可在大肠杆菌中稳定可溶性表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周虹	军事医学科学院野战输血研究所	69	379	10.0	14.0
2	刘明	哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室	65	347	11.0	15.0
3	王秀宏	哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室	15	55	4.0	6.0
4	王志刚	军事医学科学院野战输血研究所	2	11	2.0	2.0
5	滕悦秋	军事医学科学院野战输血研究所	1	5	1.0	1.0