致病钩体表层膜蛋白新基因(Lslp)的克隆表达及免疫原性研究

• 作者: 张会东 胡昌华 谢建平 鲍朗
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 钩端螺旋体 表层膜蛋白基因Lslp 克隆表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 500-503
• 页数: 4页
• 分类号: R379.5
• 字数: 3125字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2004.04.020

摘要

克隆表达钩端螺旋体表层膜蛋白新基因Lslp并分析表达产物的免疫原性.根据前期研究得到的致病钩体新基因Lslp(GenBank AF325807)的序列设计引物,在6株致病钩体中扩增Lslp基因并测序.以BamHⅠ酶切Lslp和pGEX 1-λT,构建重组质粒并用酶切和PCR鉴定,进一步在大肠杆菌中诱导表达,并进行免疫印迹分析;纯化表达产物免疫家兔,ELISA检测血清抗体滴度.结果显示Lslp在6株致病钩体中均能扩增出相应片段,且序列同源性达到99.6%;构建高效原核表达重组质粒pGST-LslP,经IPTG诱导在大肠杆菌中可表达出66kD GST融合蛋白,并能与全钩抗血清发生免疫印迹反应;将上述融合蛋白免疫新西兰大白兔产生1:5120 高滴度的IgG抗体.研究结果提示致病钩体膜蛋白新基因Lslp可在大肠杆菌进行高效表达,表达产物能被全钩抗血清识别,为研究钩体的致病机制和筛选保护性抗原提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍朗	四川大学华西医学中心	84	212	7.0	10.0
2	胡昌华	西南师范大学生命科学学院现代生物医药研究所	7	16	2.0	4.0
6	张会东	四川大学华西医学中心	42	109	6.0	8.0
7	谢建平	西南师范大学生命科学学院现代生物医药研究所	18	123	7.0	10.0