抗肝癌细胞噬菌体单链抗体库的构建及筛选

• 作者: 安利国 王清明 粘红 范国才 赵岩 陈吉中
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 生物学
• 关键词: 肝癌细胞 单链抗体(scFv) 噬菌体抗体库 筛选
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 357-361
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4236字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2004.05.002

摘要

构建抗人肝癌细胞单链抗体库,从中筛选与肝癌细胞特异结合的高亲和力单链抗体.从Hep G2细胞免疫的BALB/c小鼠脾脏提取总RNA,RT-PCR扩增小鼠抗体重、轻链可变区基因,用(Gly4Ser)3 连接肽基因,经重叠延伸反应,在体外将VH和VL连接成单链抗体(scFv)基因,并克隆入噬菌粒载体pCANTAB5E中,构建噬菌体单链抗体库.以Hep G2细胞为抗原对抗体库进行淘选,ELISA法鉴定各单克隆与肝癌细胞的结合活性,并对阳性克隆进行表达.成功构建了库容为1.1×106抗肝癌细胞的噬菌体单链抗体库,经筛选得到了与Hep G2细胞具有较强结合能力的单链抗体,实现了scFv在大肠杆菌中的可溶性表达.序列测定结果表明,VH和VL基因符合小鼠抗体可变区特征,scFv基因拼接正确.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范国才	军事医学科学院放射医学研究所	19	59	4.0	6.0
2	陈吉中	军事医学科学院放射医学研究所	19	61	4.0	6.0
3	王清明	军事医学科学院放射医学研究所	41	262	9.0	14.0
4	赵岩	吉林大学生命科学学院	173	1110	15.0	28.0
5	安利国	山东师范大学生命科学院	97	1390	21.0	34.0
6	粘红	军事医学科学院放射医学研究所	1	4	1.0	1.0