刚地弓形虫RH株主要表面抗原1的原核表达和纯化及免疫反应性检测

• 作者: 何伟 华万全 司进 徐明 朱荫昌 梁幼生 殷旭仁 汤俊明 赵松
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫病 抗原 免疫诊断
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 基础实验诊断研究
• 页码范围: 107-109
• 页数: 3页
• 分类号: R446
• 字数: 3056字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1009-9158.2004.02.018

摘要

目的对重组的刚地弓形虫RH株主要表面抗原1(SAG1)原核表达载体SAG1/pET-32c, 在大肠杆菌中诱导表达产物进行亲和纯化β免疫反应性检测评价.方法接种含SAG1/pET-32c的BL21单菌落至LB肉汤中,1∶ 100稀释转种后用1 mmol/L 终浓度的IPTG诱导表达,表达产物用Ni2+螯合柱亲和纯化,并用免疫印迹技术对纯化的融合蛋白进行免疫反应性检测,用重组融合蛋白对弓形虫病52份阳性和40份阴性血清进行初步检测. 结果 SAG1/pET-32c在原核系统中,经诱导表达出约37 000大小的融合蛋白,并以包涵体的形式存在;通过Ni2+亲和柱纯化可获得SAG1重组融合蛋白.免疫印迹试验表明,重组SAG1融合蛋白能被弓形虫阳性血清特异性的识别.初步检测表明,阳性和阴性符合率分别为81%(42/52)和95%(38/40).结论 SAG1在原核系统获得高效表达,亲和纯化的rSAG1具有较强的免疫反应性,对弓形虫病的免疫诊断具有潜在应用价值,也为人用或兽用的弓形虫病免疫诊断试剂盒研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤俊明		3	11	2.0	3.0