RON基因反义核酸真核表达载体的构建及其对A549的体外作用

• 作者: 徐利军 李军 潘铁成 赵金平 陈涛 魏翔
• 来源期刊: 中华老年多器官疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RON基因 受体酪氨酸激酶 核酸类,反义 肺癌A549 抑制
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 283-288
• 页数: 6页
• 分类号: R5
• 字数: 3349字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-5403.2004.04.014

摘要

目的肺癌的发生是多因素作用的结果,RON基因参与其中,但它在肺癌的基因治疗中意义尚不明确.本研究旨在探讨RON能否作为肺癌的基因治疗靶点及针对该基因跨膜区段(RONm)反义核酸对肺癌细胞的生物学功能的影响.方法从人肺鳞癌细胞提取总RNA进行RT-PCR、T载体克隆和测序,获得RON基因的跨膜区段,并将其反向插入真核表达载体中,转染肺癌细胞,利用ELISA检测细胞模型RON基因表达后的蛋白水平,同时利用MTT和细胞记数方法监测细胞的生物学活性的变化.结果用RT-PCR亚克隆RONm,测序结果与GenBank(X70040)一致.构建的RONm反义真核表达载体,转染后的肺癌细胞株A549 RON基因表达量和细胞活性明显降低.结论成功构建RONm反义核酸真核表达载体,RON能作为肺癌的基因治疗靶点;RONm反义核酸可有效抑制RON基因的表达阳性肺癌细胞的生长,为进一步研究将RONm反义核酸作为一种的肺癌基因治疗方法打下了分子生物学基础.