β-D-半乳糖苷酶活性测定方法的研究

• 作者: 周晓辉
• 来源期刊: 河北工业科技
• 学科: 医学
• 关键词: β-D-半乳糖苷酶 活性测定 粘膜
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 16-18
• 页数: 3页
• 分类号: Q556|R735
• 字数: 2660字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-1534.2004.05.006

摘要

应用分光光度计建立一种简便检测β-D-半乳糖苷酶(GAL)活性的方法.酶反应条件研究表明,在总体积为1 mL的0.1 mol/L柠檬酸反应缓冲体系(pH值为4.5)中含0.8 μmol的底物邻硝基苯β-D-吡喃半乳糖(ONPG),含相当于2 mg左右蛋白质的酶提取液,37 ℃孵育30 min后用0.5 mol/L碳酸钠1 mL终止反应,用紫外分光光度计于405 nm波长测定的吸光度值最能反映该酶活性.结果显示,该方法的批内变异系数在3.92%～4.89%之间,批间变异系数为3.8%,均小于5%;在所检测该酶质量浓度范围(1～2.5 mg/mL)内线性关系良好,当反应体系的蛋白含量低于0.5 mg/mL时,酶活性不能被检出;每组的平均回收率均在95%～105%之间,说明在所检测浓度范围内回收良好.因此,该方法具有稳定性好、灵敏度高、简便易行等特点,适合一般实验室应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周晓辉	河北科技大学生物科学与工程学院	16	84	6.0	8.0