限制性酶切片段差异显示及其应用

• 作者: 李杰芬 王剑 胡岳山
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 限制性酶切片段差异显示 TaqⅠ酶切 接头 假阳性率
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 综述
• 页码范围: 65-66
• 页数: 2页
• 分类号: Q78
• 字数: 2041字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2004.01.022

摘要

差异显示技术(DD)-PCR是一种研究基因表达差异的重要而应用广泛的方法,传统的差异显示法由于在PCR时采用Poly(T)引物和随机引物而导致较高的假阳性率和产物的近Poly(A)非编码区的大量扩增.改进后的限制性酶切片段差异显示技术(RFDD)-PCR采用TaqⅠ酶切双链cDNA,连上特殊设计的接头,再用经特殊设计的特异性配对于接头的引物来扩增,因此能重点扩增编码区并能极大地消除假阳性率.由于扩增时引物就带有荧光或放射性核素标记,还使得差异显示条带的检测更为方便、灵敏.本文简要介绍了该法的原理、步骤、应用及其优缺点.