恙虫病东方体Sxh951株56kD蛋白的表达及其在ELISA中的应用

• 作者: 张雪颖 温博海 牛东升 陈唯军 陈梅玲 陈香蕊
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 恙虫病东方体 蛋白基因 克隆表达 免疫印迹 ELISA
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 免疫检测
• 页码范围: 155-158
• 页数: 4页
• 分类号: R44
• 字数: 4033字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.02.027

摘要

目的构建含Orientia tsutsugamushi Sxh951株(Ot. Sxh951)相对分子质量(Mr)为56×103外膜蛋白基因(sxh56)的重组质粒pQE30/56,表达Mr 56×103蛋白并观察其在ELISA中的应用. 方法 IPTG诱导sxh56重组质粒;观察SDS-PAGE和免疫印迹结果;经Ni-NTA亲和层析纯化后的重组蛋白分别与Ot. Gilliam、Ot. Karp、Ot. Kato感染鼠血清进行ELISA和免疫印迹检测. 结果 SDS-PAGE和免疫印迹检测显示有一Mr约为56×103的特异蛋白带;ELISA和免疫印迹结果显示该重组蛋白只与Ot. Gilliam感染鼠血清呈阳性反应;重组蛋白用作ELISA包被抗原检测小鼠血清抗体IgG,特异性为100%,敏感性96.67%;检测人血清抗体IgG的敏感性为88.08%,特异性96.36%. 结论表达的重组Sxh56蛋白具有良好的免疫反应性;其作为ELISA包被抗原,具有良好的特异性和敏感性.