恙虫病东方体Gilliam株56kDa蛋白部分基因的原核表达及初步鉴定

• 作者: 吴光华 唐家琪 张云 操敏 朱进 王长军 郁兴明 郭恒彬
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 恙虫病东方体 56kDa蛋白 基因表达 诊断
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 82-85
• 页数: 4页
• 分类号: R376+.2
• 字数: 3583字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2003.03.021

摘要

目的对恙虫病东方体Gilliam株56kDa蛋白部分基因进行原核表达,以获得高效表达、有生物活性目的蛋白,为恙虫病诊断试剂的研制打下基础.方法根据Gilliam株东方体56kDa蛋白基因序列设计特定引物,用PCR法扩增出编码56kDa抗原富含亲水区及同源性高的C端一段长约700bp的DNA,插入原核载体PGEX-4T-2,转化大肠杆菌TGI,抽提质粒,酶切鉴定,含插入片段的重组质粒进行序列分析,再转化表达宿主菌大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,用SDS-PAGE及Western-blot进行分析鉴定.结果SDS-PAGE检测表明该截短片段以融合蛋白的方式得到成功表达,在相对分子量58kDa处有表达条带,经薄层扫描分析,目的蛋白条带占全菌蛋白的30.5%.Western-blot证实该融合蛋白能被恙虫病患者阳性血清识别.结论表达产物初步鉴定具有生物活性,有望应用于恙虫病诊断试剂的研制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郁兴明		39	162	8.0	10.0
2	王长军		134	625	12.0	17.0
3	唐家琪		103	711	14.0	22.0
4	张云		72	377	11.0	15.0
5	朱进		66	357	9.0	16.0
6	吴光华		86	556	13.0	20.0
7	郭恒彬		49	362	11.0	17.0
8	操敏		30	131	7.0	9.0