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丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活基因6的反式激活基因的筛选
丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活基因6的反式激活基因的筛选
作者:
党晓燕
刘妍
成军
杨倩
王建军
王春花
纪冬
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
摘要:
目的:筛选与克隆NS5A反式激活的新型靶基因NS5ATP6的反式激活基因,探讨其可能存在的调节功能.方法:应用抑制性消减杂交(SSH)技术及生物信息学(bioinformatics)技术筛选并克隆NS5ATP6反式激活的新型靶基因.以NS5ATP6表达质粒pcDNA3.1(-)-NS5ATP6转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaⅠ酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.结果:成功构建人NS5ATP6反式激活基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后得到33个阳性克隆,进行菌落PCR分析,均得到200-2000 bp插入片段.对插入片段测序,并通过生物信息学分析获得其全长基因序列,结果共获得26种编码基因,包括24种已知基因和2种未知基因.结论:筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞生长调节、信号转导、肿瘤免疫发生及细胞凋亡密切相关的蛋白编码基因,推测了NS5ATP6可能存在的调控机制的线索,尚需进一步的实验证明.
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篇名
丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活基因6的反式激活基因的筛选
来源期刊
世界华人消化杂志
学科
医学
关键词
年,卷(期)
2004,(1)
所属期刊栏目
病毒性肝炎
研究方向
页码范围
54-57
页数
4页
分类号
R575
字数
4090字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1009-3079.2004.01.014
五维指标
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期刊影响力
世界华人消化杂志
主办单位:
太原消化病研治中心
出版周期:
旬刊
ISSN:
1009-3079
CN:
14-1260/R
开本:
大16开
出版地:
社址:山西省太原市双塔西街77号;办公地址:北京市朝阳区东四环中路62号,远洋国际中心D座903室
邮发代号:
22-117
创刊时间:
1993
语种:
chi
出版文献量(篇)
13630
总下载数(次)
16
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英文译名:
官方网址:
项目类型:
学科类型:
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
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