丙型肝炎病毒核心蛋白反式激活基因TAHCCP1的克隆化研究

• 作者: 党晓燕 刘妍 张玲霞 成军 杨倩 王建军 王春花 纪冬
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎样病毒属 核心蛋白 反式激活(遗传学)
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 237-239
• 页数: 3页
• 分类号: R512.6+3
• 字数: 2561字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2004.03.013

摘要

目的筛选并克隆丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(core)反式激活的新型靶基因.方法以HCV核心蛋白表达质粒pcDNA3.1(-)-core转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析.分析筛选出来的基因,其中之一与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源性.通过序列同源性搜索比对及电子拼接,根据基因起始密码子的Kozak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷酸信号序列,确定新型基因序列.从转染pcDNA3.1(-)-core的HepG2细胞提取总RNA,以RT-PCR技术扩增获得该新基因的全长序列,并对克隆的基因及其编码产物的序列进行分析.结果该新基因的编码序列全长为2 001nt,编码产物由667aa组成,并测序证实,命名为TAHCCP1,在GenBank中注册,注册号为AY038359.结论发现并鉴定、克隆了HCV核心蛋白反式激活作用的新型靶基因TAHCCP1,为进一步研究HCV核心蛋白反式激活作用的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定了基础.