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丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活基因8的克隆化研究
丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活基因8的克隆化研究
作者:
党晓燕
成军
杨艳杰
王春花
钟彦伟
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
丙型肝炎病毒
反式激活
新基因
克隆化
摘要:
目的丙型肝炎病毒(HCV)的非结构蛋白5A(NS5A)是一种具有显著反式激活作用的病毒蛋白质.为了探索HCVNS5A病毒蛋白反式激活作用的新的靶基因,我们应用抑制性消减杂交(SSH)技术对于转染和未转染的肝母细胞瘤细胞系HepG2进行分析.研究结果将有助于阐明HCV感染相关疾病的发病机制.方法以HCV NS5A表达质粒pcDNA3.1(-)-NS5A转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,提取mRNA并进行SSH分析.对于所获基因片段序列分析表明,其中之一为新型基因片段,与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源性,利用表达序列标签(EST)序列的搜索和比对,进行电子拼接,根据基因起始密码子的Kozak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷酸信号序列,确定新型基因序列.结果结果从HepG2细胞提取总RNA,多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列,测序证实,命名为NS5ATP8在GenBank中注册,注册号为AF529369.NS5ATP8基因的编码序列全长为1 449(nt),编码产物由483个氨基酸残基(aa)组成.结论HCV NS5A反式激活新型靶基因NS5ATP8筛选与克隆,进一步研究HCV NS5A反式激活作用的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定基础.
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篇名
丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活基因8的克隆化研究
来源期刊
胃肠病学和肝病学杂志
学科
医学
关键词
丙型肝炎病毒
反式激活
新基因
克隆化
年,卷(期)
2004,(1)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
31-34
页数
4页
分类号
R512.63
字数
2817字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1006-5709.2004.01.009
五维指标
传播情况
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引文网络
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反式激活
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研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
胃肠病学和肝病学杂志
主办单位:
郑州大学
出版周期:
月刊
ISSN:
1006-5709
CN:
41-1221/R
开本:
16开
出版地:
郑州市大学路40号
邮发代号:
36-159
创刊时间:
1992
语种:
chi
出版文献量(篇)
6661
总下载数(次)
9
总被引数(次)
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