怀地黄ISSR扩增条件优化的研究

• 作者: 周延清 景建洲 李振勇 浩健 贾敬芬
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 怀地黄 ISSR PCR 条件优化
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 6-11
• 页数: 6页
• 分类号: Q946-33
• 字数: 685字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4025.2004.01.002

摘要

用CTAB法提取怀地黄嫩叶DNA,进行简单重复间序列标记(ISSR)分析.通过单因子实验分别研究了退火温度、Taq酶单位、Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度和模板DNA浓度对ISSR-PCR反应的影响,找出各自的合适条件,而且每一个合适条件确定以后都被作为后续研究的一个条件.通过各个因子的组合研究建立了适宜于怀地黄ISSR分析的扩增体系:25 μL PCR反应体积,1×Taq DNA酶缓冲液(10 mmol/L Tris-HCl,50 mmol/L KCl,0.1% Trion X-100,pH9.0 ),2.5 mmol/L MgCl2,1.5～1.0 U Taq酶,60 ng模板DNA,0.4 μmmol/L引物,各0.4 mmol/L的dATP、dGTP、dCTP和dTTP.合适的退火温度为53～55℃.为用ISSR技术分析鉴定怀地黄种质资源奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李振勇		17	426	8.0	17.0
2	贾敬芬	西北大学生命科学学院	105	1804	21.0	38.0
3	周延清	西北大学生命科学学院	7	423	6.0	7.0
4	景建洲		5	326	4.0	5.0
5	浩健		2	139	2.0	2.0