山茶ISSR扩增条件的优化

• 作者: 李钧敏 潘仙鹏 谈探 金则新
• 来源期刊: 福建林业科技
• 学科: 生物学
• 关键词: 山茶 ISSR 扩增条件 优化
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 页码范围: 24-27
• 页数: 4页
• 分类号: Q946
• 字数: 3423字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-7351.2007.02.006

摘要

以山茶基因组DNA为材料,测试山茶ISSR扩增的最适退火温度,并采用单因素试验,测试了模板DNA量,Mg2+浓度,dNTP浓度,BSA浓度,引物用量,Taq酶用量等6个因素对山茶ISSR扩增的影响.结果显示:山茶ISSR扩增的最适退火温度为56.3℃;适宜的扩增体系为:10 μL PCR反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol·L-1 Tris·HCl pH 9.0,50 mmol·L-1 KCl,0.1% Triton X-100),2 mmol·L-1 MgCl2,0.6 mmol·L-14×dNTP,2 mg·ml-1BSA,16 ng模板DNA,10 pmol引物,0.5 U Taq酶.