猪γ-干扰素双顺反子表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 曹瑞兵 蔡梅红 陈德胜 陈溥言
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪γ-干扰素 基因克隆 双顺子表达 活性测定
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 52-55
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 4099字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2004.01.020

摘要

提取经ConA诱导培养的猪外周血白细胞总RNA,RT-PCR扩增出猪IFN-γ基因并克隆到pGEM-T-easy载体,测序结果表明,扩增片段为含有信号肽的猪IFN γ完整基因.亚克隆猪lFN γ成熟蛋白编码基因,并对其5'段前2个稀有密码子进行大肠杆菌偏嗜性改造.通过引入SD序列,成功构建了猪IFN-γ原核双顺反子表达载体pLCS-poIFN2G,并实现了猪IFN-γ在大肠杆菌中的离表达,约占菌体总蛋白的56.5%.表达产物以包涵体形式存在,用含7mol/L盐酸胍的变性液溶解及含0.5mol/L盐酸胍复性液复性处理,复性后的表达产物经凝胶层析纯化后,细胞病变抑制法测定结果表明,重组猪IFN-γ具有较高干扰素活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈溥言	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	269	2875	28.0	40.0
2	曹瑞兵	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	71	897	19.0	28.0
3	陈德胜	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	34	786	14.0	27.0
4	蔡梅红	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	5	148	4.0	5.0