真核表达载体pIRES2-EGFP-p93的构建及在卵巢癌细胞HO-8910中的表达

• 作者: 刘淑娟 吴元明 辛晓燕 陈苏民 韩军涛
• 来源期刊: 西北国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DOC-2 真核表达载体 卵巢癌
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 321-324
• 页数: 4页
• 分类号: R644
• 字数: 2825字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-8622.2004.05.001

摘要

目的:构建肿瘤抑制基因DOC-2的真核表达载体pIRES2-EGFP-p93,将其转入人源性卵巢癌细胞株HO-8910中,并得到稳定表达.方法:利用XhoI酶切含有p93cDNA 的质粒得到p93cDNA基因片段,将其正向连接入真核表达载体pIRES2-EGFP,并通过酶切鉴定.用脂质体介导的方法,将真核表达载体pIRES2- EGFP-p93 转染人卵巢癌细胞系HO-8910,通过G418筛选稳定表达克隆;分别在荧光显微镜下及用免疫组化法观察人DOC-2蛋白在卵巢癌细胞系HO-8910中的表达.结果:构建了DOC-2的真核表达载体pIRES2-EGFP-p93,并通过酶切鉴定.在荧光显微镜下,转染了pIRES2-EGFP-p93的人卵巢癌细胞HO-8910发出绿色荧光,荧光全部集中于胞浆内.免疫细胞化学染色结果显示转染了pIRES2-EGFP-p93的人卵巢癌细胞HO-8910胞浆呈棕黄色,而转染空载体的细胞呈阴性染色.结论:成功构建了真核表达载体转染了pIRES2-EGFP-p93,并在人卵巢癌细胞系HO-8910中稳定表达,为研究DOC-2蛋白对卵巢癌细胞的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	辛晓燕	第四军医大学西京医院妇产科	297	1601	18.0	24.0
2	刘淑娟	第四军医大学西京医院妇产科	66	227	8.0	10.0
3	陈苏民	第四军医大学生物化学与分子生物学教研室	100	695	11.0	23.0
4	韩军涛	第四军医大学烧伤科	54	252	10.0	12.0
5	吴元明	第四军医大学生物化学与分子生物学教研室	38	207	6.0	12.0