新型Smad7 重组腺病毒载体的构建

• 作者: 李定国 胡良凯 陈源文 陈颖伟
• 来源期刊: 上海第二医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: Smad7 腺病毒载体 TGF-β 信号转导
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 417-420
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 字数: 2812字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2004.06.002

摘要

目的构建鼠Smad7重组复制缺陷型腺病毒载体(AdSmad7).方法采用常规分子生物学方法,抽提SD大鼠肝脏总RNA,RT PCR获得鼠Smad7 cDNA片段,插入腺病毒穿梭载体质粒pAdDTrack CMV启动子下游,构建重组穿梭载体pAdTrack CMV Smad7,线性化后与腺病毒骨架载体质粒AdEasy 1在细菌BJ5183内同源重组,鉴定后在HEK293细胞包装成重组腺病毒AdSmad7.RT PCR检测AdSmad7在HEK293中的表达情况.结果该重组缺陷型腺病毒载体经测序、限制性内切酶酶切分析、PCR等鉴定,与预期结果一致;重组腺病毒质粒转染HEK293细胞后3 d可观察GFP明显表达;RT PCR检测证实Smad7表达增强.结论利用新型腺病毒载体AdEasy系统可快速构建同时表达GFP和Smad7的重组复制缺陷型腺病毒AdSmad7,为进一步研究TGFβ信号转导和肝纤维化的基因治疗奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李定国	上海第二医科大学新华医院消化内科	199	2157	25.0	37.0
2	陈源文	上海第二医科大学新华医院消化内科	13	171	7.0	13.0
3	陈颖伟	上海第二医科大学新华医院消化内科	27	338	10.0	17.0
4	胡良凯	上海第二医科大学新华医院消化内科	6	26	3.0	5.0