pcDNA3.0/mbcl-2α真核表达载体的构建及其在L929细胞中的表达与实验研究

• 作者: 庄文卓 杨吉成 王金志 白艳艳 盛伟华 缪竞诚 谢宇锋
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: mbcl-2α 基因转染 细胞增殖 MTT 药物敏感性
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 602-606
• 页数: 5页
• 分类号: R394.8
• 字数: 4112字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0399.2004.05.005

摘要

目的构建重组真核表达载体pcDNA3.0/mbcl-2α,并在L929细胞中稳定表达,研究mbcl-2α基因表达对L929细胞生物学行为的影响.方法用PCR法从含mbcl-2α基因的载体pORF-mbcl-2α获得目的基因片段,正向克隆入真核表达质粒pcDNA3.0中.pcDNA3.0/mbcl-2α以脂质体法转染L929细胞,经G418加压筛选,获得阳性单克隆细胞,用RT-PCR检测克隆细胞中mbcl-2α基因的转录,细胞免疫组化染色法检测蛋白表达.台盼兰拒染法进行活细胞计数,判定细胞增殖速率;MTT比色法测定化疗药物阿霉素对细胞生长的抑制率,并分析药物敏感性.结果构建了重组真核表达载体pcDNA3.0/mbcl-2α,并在L929细胞中稳定表达,获得了可稳定表达mbcl-2α基因的L929细胞株.L929细胞转mbcl-2α基因后,其增殖速率高于对照组,而药物敏感性低于对照组.结论 pcDNA3.0/mbcl-2α在L929细胞中可稳定表达,对L929细胞的增殖和药物敏感性均具有一定的影响,为进一步研究mbcl-2α基因的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪竞诚	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	95	511	13.0	17.0
2	盛伟华	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	129	700	15.0	18.0
3	谢宇锋	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	51	324	11.0	15.0
4	庄文卓	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	13	34	4.0	4.0
5	王金志	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	20	105	6.0	9.0
6	白艳艳	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	10	61	4.0	7.0