修饰后日本血吸虫Sjc-97基因的真核表达及其免疫原性

• 作者: 周爱国 庄英萍 张冬梅 潘卫庆 邢金花 钱磊
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 副肌球蛋白 毕氏酵母 基因表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 专题报道:疟疾、囊虫病、乙型肝炎等疾病的基因工程疫苗研究
• 页码范围: 29-33
• 页数: 5页
• 分类号: R383.24
• 字数: 4157字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2004.01.008

摘要

目的:研究日本血吸虫大陆株副肌球蛋白基因第3区域片段(Sjc-97f3)毕氏酵母表达产物的免疫原性.方法:根据毕氏酵母密码子使用频率重新设计Sjc-97核苷酸序列,依据不对称PCR原理人工合成Sjc-97f3,并在毕氏酵母中表达.表达产物通过Ni-NTA亲和层析和凝胶过滤层析方法纯化,再分别与ISA720和Al(OH)3佐剂乳化后,免疫C57BL/6和昆明小鼠,通过尾蚴膜反应和ELISA反应检测特异性抗体.结果:Sjc-97f3基因在毕氏酵母中获得了高水平分泌表达,其表达产物能与日本血吸虫免疫血清进行特异性免疫反应.经与佐剂乳化后,该蛋白具有良好的免疫原性.ELISA结果显示重组蛋白在小鼠体内可激发明显的抗体反应,但2种佐剂所诱导的抗体水平以ISA720佐剂为高; 该抗原在不同品系小鼠中的抗体水平存在显著差异(P<0.01),昆明鼠的抗血清滴度远高于C57BL/6小鼠.小鼠免疫血清能识别日本血吸虫表面抗原,产生特异的尾蚴膜反应. 结论:密码子优化的Sjc-97f3在毕氏酵母中获得高效表达,其产物具有良好的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	庄英萍	华东理工大学生物工程学院	180	1652	23.0	30.0
2	张冬梅	第二军医大学基础医学部病原生物学教研室	35	168	5.0	12.0
3	钱磊	第二军医大学基础医学部病原生物学教研室	1	3	1.0	1.0
7	邢金花	第二军医大学基础医学部病原生物学教研室	2	5	2.0	2.0
11	周爱国	第二军医大学基础医学部病原生物学教研室	3	6	2.0	2.0