超抗原SED突变体的构建表达和鉴定

• 作者: 朱锡华 李亚斐 杨劲 黄云辉
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 超抗原 葡萄球菌肠毒素D 突变体
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 47-50
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11|R392.13|R394-33
• 字数: 3028字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2004.01.014

摘要

目的在预测的SED免疫识别活性位点处引入定点突变,构建SED突变体.方法分别设计侧翼引物和突变引物,用megaprimer PCR方法引入突变碱基,将PCR产物与pTrcHis-B质粒连接,转化E.coli DH5α,用IPlG进行诱导表达,金属螫合亲和层析法纯化,免疫印迹检测纯化的蛋白.结果测序结果表明在相应的位置引入了正确突变,SDS-PAGE和免疫印迹检测结果证实了目的蛋白的表达,将构建成功的突变体分别命名为SEDN23A、SEDN23A/H26R、SEDF45A、SEDL59A、SEDN61A、SEDl92A和SEDF203A.结论成功构建了一系列SED突变体,为后续的免疫识别研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱锡华	第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所	50	252	7.0	13.0
2	杨劲	第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所	45	153	7.0	8.0
3	黄云辉	第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所	23	73	5.0	6.0
4	李亚斐	第三军医大学军事预防医学系流行病学教研室	51	289	9.0	14.0