人P56蛋白及其各种缺失突变体酵母表达质粒的构建及鉴定

• 作者: 廖兰 徐建明 李淑蓉 王军平 王蒙 粟永萍 蒋建新 邓正阳 黄跃生
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 干扰素 P56 RT-PCR 重组质粒
• 年，卷（期）: 2004,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 561-564
• 页数: 4页
• 分类号: Q516|Q782|R394-33
• 字数: 2857字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2004.07.001

摘要

目的构建干扰素诱导蛋白P56及其各种缺失突变体的酵母表达质粒.方法干扰素诱导HT1080,提取mRNA、RT-PCR获取P56全长及各种缺失突变体的cDNA,以酵母表达质粒pCADT7为载体,构建重组质粒.结果诱导的HT1080中抽提出P56的mRNA、RT-PCR扩增出P56全长cDNA片段,大小与预期值一致约1 500 bp,以P56全长cDNA为模板PCR获得P56各种缺失突变体并插入pCADT7;正确构建了各种pGADT7-P56酵母表达重组质粒.这些质粒DNA测序结果与理论值一致.结论P56全长及各种缺失突变体酵母表达质粒的成功构建,为进一步研究P56功能奠定了基础.