人糖基磷脂酰肌醇(GPI)-B7-1真核表达载体的构建及表达

• 作者: 宋畅 朱振宇 李民友 李秀英 熊茂林 罗荣城 罗超权
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 糖基磷脂酰肌醇类 基因,B7-1 CHO细胞 真核表达 印迹法,蛋白质
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 154-158
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 2721字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2005.01.035

摘要

目的:在仓鼠卵巢细胞CHO细胞中高效表达糖基磷脂酰肌醇GPI-B7-1(B7-1即CD80)融合蛋白,获得大量融合蛋白以研究GPI-B7-1在肿瘤治疗中的应用潜力.方法:构建真核表达载体pc3.1/GPI-B7-1,利用脂质体lipofectamine 2000将其转染CHO细胞,G418加压筛选抗性克隆,流式细胞仪检测细胞膜上GPI-B7-1融合蛋白的表达情况,SDS-PAGE、Western blot分析鉴定其免疫活性.结果:真核表达载体转染CHO细胞经G418筛选后,流式细胞分析证实为GPI锚定蛋白,SDS-PAGE在60 kD左右蛋白表达量明显高于对照组,在Western blot在60kD左右有一条强的棕色条带,说明GPI-B7-1在CHO中得到表达.结论:在CHO细胞中高效表达GPI-B7-1融合蛋白,可获得大量融合蛋白,对进一步研究GPI-B7-1在肿瘤治疗中的应用打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗荣城	第一军医大学南方医院肿瘤科	68	704	15.0	23.0
2	罗超权	中山大学中山医学院生化教研室	20	115	5.0	10.0
3	李秀英	中山大学中山医学院生化教研室	15	75	5.0	8.0
4	朱振宇	中山大学中山医学院生化教研室	51	397	8.0	18.0
5	李民友	中山大学中山医学院生化教研室	8	33	3.0	5.0
6	熊茂林	中山大学中山医学院生化教研室	3	15	3.0	3.0
7	宋畅	中山大学中山医学院生化教研室	2	8	2.0	2.0