SARS冠状病毒囊膜E蛋白的重组表达与单克隆抗体制备

• 作者: 丁天兵 任君萍 宋建华 徐志凯 王平 黄庆生
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: SARS冠状病毒 囊膜蛋白 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 485-487
• 页数: 3页
• 分类号: Q78|Q813
• 字数: 2968字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2005.05.004

摘要

从基因库中调取SARS冠状病毒囊膜E蛋白基因序列,用连接PCR方法合成完整片段.测序确认后与人免疫球蛋白(IgG)序列Fc段连接并克隆至原核表达载体pPRO EX Hta中.从SDS-PAGE凝胶中回收表达产物后免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性单克隆抗体(mAb).连接PCR扩增出231 bp的DNA,测序结果与GenBank公布的序列一致,与人IgG序列Fc段基因连接后克隆至原核表达载体,在大肠杆菌中获得较好表达.表达产物经SDS-PAGE后,在相对分子质量(Mr)约37 000处可见1条明显的诱导表达条带.Western印迹的结果表明,该电泳带与SARS患者的恢复期血清呈特异性免疫反应.从SDS-PAGE凝胶中回收表达产物并免疫BALB/c小鼠,制备出2株抗E蛋白的mAb.这些mAb与SDS-PAGE凝胶上Mr约为37 000的蛋白带也呈现很强的免疫反应.所获得的重组表达E蛋白及特异性mAb为进一步建立SARS病毒感染早期诊断的方法奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐志凯	第四军医大学微生物教研室	216	1097	15.0	22.0
2	黄庆生	第四军医大学微生物教研室	8	53	4.0	7.0
3	任君萍	第四军医大学微生物教研室	18	51	5.0	6.0
4	丁天兵	第四军医大学微生物教研室	32	161	7.0	11.0
5	宋建华	第四军医大学微生物教研室	13	62	5.0	7.0
6	王平	第四军医大学微生物教研室	12	35	4.0	5.0