条纹斑竹鲨鱼再生肝组织cDNA质粒文库的构建和鉴定

• 作者: 余江河 刘睿 叶波平 吴梧桐 王旻 王颖 胡亚楠 赵艳景
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 鲨鱼 再生肝组织 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 资源环境技术
• 页码范围: 82-86
• 页数: 5页
• 分类号: Q95
• 字数: 3942字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2005.05.018

摘要

建立了鲨鱼肝脏的部分切除模型,获得了再生24h的鲨鱼肝组织,分离了再生肝组织的总RNA,纯化了mRNA,利用含BamHI酶切位点的Oligo(dT)16为引物合成cDNA第一链,通过末端转移酶在cDNA第一链3'末端加入Oligo(dC)尾,进而以Oligo(dT)16和含HindIII酶切位点的Oligo(dG)10为引物,通过LD-PCR (long- distance-PCR)方法合成双链cDNA,将双链cDNA经BamHI和HindIII双酶切,通过T4DNA连接酶连接到经相同酶切的pUC19载体后构建成cDNA文库.对文库质量的分析结果表明,通过本方法构建的鲨鱼再生肝组织cDNA文库容量至少为4.92×105个/μg dscDNA,重组率达96.7%.对随机提取30个克隆的质粒进行分析,获得了其中25个插入片段的序列,未见重复序列,经与GenBank和dbEST数据库比对分析发现新基因在其中占较大的比例(76%).鲨鱼再生肝组织cDNA文库的成功构建为进一步通过差异显示技术筛选、克隆肝再生过程中差异表达的相关功能基因奠定了一个良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王颖	中国药科大学生命科学与技术学院	41	506	12.0	22.0
2	叶波平	中国药科大学生命科学与技术学院	105	1007	17.0	27.0
3	王旻	中国药科大学生命科学与技术学院	170	1536	20.0	32.0
4	刘睿	中国药科大学生命科学与技术学院	13	131	8.0	11.0
5	余江河	中国药科大学生命科学与技术学院	16	78	4.0	8.0
6	赵艳景	中国药科大学生命科学与技术学院	5	40	4.0	5.0
7	胡亚楠	中国药科大学生命科学与技术学院	4	52	4.0	4.0