猪圆环病毒2型核衣壳蛋白基因原核表达载体的构建及表达

• 作者: 华修国 崔立 朱建国 芦银华 谈国蕾 陈溥言
• 来源期刊: 上海交通大学学报(农业科学版)
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 Cap蛋白 大肠杆菌 表达
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 页码范围: 353-359
• 页数: 7页
• 分类号: S852.651
• 字数: 5070字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-9964.2005.04.005

摘要

用PK-15细胞增殖PCV-2病毒,提取病毒DNA,用PCR方法扩增核衣壳蛋白(Cap蛋白)全基因,克隆到pET-32a载体中,构建了表达载体pETORF2,转化入大肠杆菌BL21中,用IPTG进行诱导表达,结果显示表达的蛋白大小与设计不符.同样的方法,又构建了表达载体pETRF2,含有Cap蛋白的部分基因,结果显示表达的蛋白大小依然与设计不符.对Cap蛋白编码基因进行改造,在不改变原氨基酸序列的基础上,把其编码密码子全部换成大肠杆菌偏爱密码子,根据此序列,设计了4条长引物,参照SOE的原理,用降落PCR的方法扩增出含Cap蛋白表位基因的片段,并克隆到pET-32a载体中,成功构建了重组表达载体pETP1P4.SDS-PAGE电泳结果表明,表达的蛋白分子量与设计相符.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈溥言	南京农业大学动物医学院	269	2875	28.0	40.0
2	朱建国	上海交通大学农业与生物学院	103	607	13.0	20.0
3	华修国	上海交通大学农业与生物学院	155	1291	18.0	27.0
4	崔立	上海交通大学农业与生物学院	75	540	15.0	20.0
5	芦银华	南京农业大学动物医学院	14	525	9.0	14.0
6	谈国蕾	南京农业大学动物医学院	7	254	5.0	7.0