短双歧杆菌α-D-半乳糖苷酶基因aga1在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 刘巍峰 王勤鹏 肖敏 赵晗 陆宇
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 双歧杆菌 α-D-半乳糖苷酶 温度诱导表达
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 酶和蛋白质
• 页码范围: 241-246
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 5732字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2005.02.018

摘要

短双歧杆菌(Bifidobacterium breve 203)α-D-半乳糖苷酶基因(aga1)被克隆到大肠杆菌温度诱导表达质粒pBV220中,构建重组质粒pBVaga1,转入大肠杆菌进行温度诱导表达,得到的重组酶Aga1在大肠杆菌DH5α、DH10B和BL21中的比活分别为28.08、19.44和13.85U/mg, 均高于短双歧杆菌α-D-半乳糖苷酶的比活1.76U/mg.重组质粒pBVaga1在E. coli BL21中稳定性较好.重组酶Aga1蛋白亚基分子量约67kD,最适反应温度为45℃,酶在40℃以下稳定,60℃仅剩余约5%的酶活性,70℃时酶全部失活;最适反应pH为4.0～4.4,酶在pH 3.6～6.0范围内稳定;酶对p-硝基苯酚-α-半乳糖苷的Km＝1.43mmol/L,Vmax＝35.71μmol/(L·min),对蜜二糖的Km＝261mmol/L,Vmax＝63.69μmol/(L·min);酶在蜜二糖、棉子糖水解体系中不显示转糖基活性.结果说明Aga1与已经报道的一种短双歧杆菌的α-D-半乳糖苷酶不同,是新发现的一种短双歧杆菌的α-D-半乳糖苷酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖敏	山东大学微生物技术国家重点实验室	35	433	13.0	19.0
2	刘巍峰	山东大学微生物技术国家重点实验室	20	243	10.0	15.0
3	赵晗	山东大学微生物技术国家重点实验室	8	67	5.0	8.0
4	陆宇	山东大学微生物技术国家重点实验室	1	8	1.0	1.0
5	王勤鹏	山东大学微生物技术国家重点实验室	1	8	1.0	1.0