马动脉炎病毒N蛋白基因GST融合表达载体的构建及表达

• 作者: 宋厚辉 张念祖 杜建 王志亮 金宁一
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 马动脉炎病毒 核衣壳蛋白基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2005,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 50-54
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6|Q781
• 字数: 3830字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2005.09.014

摘要

采用RT-PCR方法扩增出马动脉炎病毒核衣壳蛋白基因ORF7,并将其克隆到pMD18-T载体,构建成重组质粒pMD18-N,在上海生物工程公司测序.结果表明,所克隆的核衣壳蛋白基因序列与EAV NC-002532株的同源性为99%.表明ORF7是EAV基因组内的保守序列,将ORF7亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建成重组质粒pGEX-6P-N,用pGEX-6P-N转化表达菌株BL21(DE3),诱导表达后SDS-PAGE和Western blotting分析表明,克隆在谷胱苷肽硫转移酶(GST)下游的核衣壳蛋白基因与GST获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-N分子质量约为40 ku,为马动脉炎病毒病血清学诊断方法的建立奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王志亮		79	832	16.0	24.0
2	金宁一	军事医学科学院第十一研究所	87	502	10.0	18.0
3	宋厚辉	中国科学院微生物研究所	6	14	3.0	3.0
4	张念祖		12	58	5.0	7.0