毕赤酵母表达的HBV全长Pres蛋白的分离纯化

• 作者: 佘应龙 叶力 叶林柏 吴正辉 李宝宗 郑竑 郜金荣 韩雪 高博
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 工学
• 关键词: HBV全长PreS蛋白 发酵 分离纯化 免疫原性
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 708-712
• 页数: 5页
• 分类号: TQ93
• 字数: 5509字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.05.006

摘要

巴斯德-毕赤酵母工程菌株GS115-PreS经发酵在甲醇诱导下可高效表达分泌型全长PreS蛋白.Western blot证明发酵液中存在着可溶性的分子量为48kD的PreS蛋白和蛋白质颗粒,蛋白质颗粒主要成分为48kD的全长Pres蛋白和28kD的S蛋白,电镜观察发现蛋白质颗粒直径为30nm.发酵液经过脱盐、浓缩处理后,上清液经DEAE-SFF阴离子交换柱得到纯化的PreS蛋白;超速离心和蔗糖密度梯度离心得到蛋白颗粒.该颗粒的主要组分为全长PreS蛋白(PreS1+PreS2+S),还有少量的主蛋白(S).ELISA检测证明全长PreS蛋白和蛋白颗粒有着良好的抗原性,P/N显示蛋白颗粒的抗原性比PreS蛋白的抗原性高.