改良分子信标-双重实时荧光PCR快速检测SARS病毒

• 作者: 何建凡 何雅青 刘小立 刘建军 刘涛 周俊安 庄志雄 张丹 张永有 房师松 扈庆华 李庆阁 杨洪 王冰 石晓路 赵锦
• 来源期刊: 卫生研究
• 学科: 医学
• 关键词: SARS病毒 改良分子信标 双重实时荧光PCR 早期诊断 动物溯源
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 416-418
• 页数: 3页
• 分类号: R375|Q-331
• 字数: 3146字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8020.2005.04.011

摘要

目的建立改良分子信标-双重实时荧光PCR检测SARS病毒的方法,用于SARS的早期诊断和动物溯源.方法利用改良分子信标技术、装甲RNA和双片段双色荧光技术,根据GenBank公布的SARS病毒聚合酶基因1b的阅读开放框架结构的保守序列,自行设计一对引物和探针,以部分临床标本的酶联吸附实验结果和传统细胞培养方法作为对照,建立分子信标检测SARS病毒的方法.对368份临床标本(咽漱液、血液、粪便、尿液)、52份细胞培养液和50份动物标本进行荧光PCR扩增.结果分子信标检测SARS病毒的方法灵敏度为10～100个拷贝/ml,与流感病毒等呼吸道病毒无交叉反应.分子信标检测368份临床标本,20份阳性.其中确诊病例阳性率为21.27%(10/47),确诊病例的咽漱液阳性率为43.48%,还分别从粪便和血清中检测到SARS病毒.52份细胞培养液,29份阳性,阳性率为55.77%.50份动物标本,23份阳性,阳性率为46%.结论改良分子信标-双重实时荧光PCR检测SARS病毒方法灵敏度高、特异性强,可用于SARS的临床早期诊断和动物溯源.