凋亡素基因序列重组及其真核表达载体的构建

• 作者: 朱惠明 杨俊文
• 来源期刊: 温州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 凋亡素 真核表达载体 Kozak序列
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 468-470
• 页数: 3页
• 分类号: R73.36
• 字数: 2482字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2138.2005.06.010

摘要

目的:提高凋亡素基因在肿瘤细胞中的表达效率,增强其诱导肿瘤细胞凋亡的生物学活性.方法:通过两次PCR,以pcDNA-VP3质粒为模板,扩增出带Kozak序列(真核核糖体结合位点)的凋亡素基因VP3.将其克隆到真核表达载体pRevTRE的多克隆位点,构建成凋亡素的真核表达载体pRevTRE-VP3,将该质粒分别以限制性内切酶BamHI和XhohI进行酶切鉴定,将初步鉴定显示可能克隆有目的基因的质粒进行测序鉴定.结果:测序结果表明,本研究合成的凋亡素基因与Noteborn报告的凋亡素基因序列一致,同源性为l 00%.在其起始密码子前添加了Ko zak序列的凋亡素基因已成功克隆到真核表达载体pRevTRE.结论:采用两次PCR法可提高表达效率的真核核糖体结合位点添加到凋亡素基因序列起始密码子前端,并构建成凋亡素真核表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱惠明	深圳市人民医院消化内科	21	32	3.0	4.0
2	杨俊文	温州医学院第一附属医院消化内科	10	51	3.0	6.0