里氏木霉内切-β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达

• 作者: 乔宇 何永志 毛爱军 董志扬 韦跃华
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 医学
• 关键词: 内切甘露聚糖酶 分泌表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 878-883
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4711字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.06.005

摘要

采用PCR方法从里氏木霉(Trichoderma reesei)基因组中获得含有两个内含子的内切-β-甘露聚糖酶全长基因,末端重叠延伸PCR去除内含子后,将其插入到巴斯德毕赤酵母(Picher pastoris)表达载体pPIC9K中,位于α-因子信号肽序列的下游,并与之同框,获得重组质粒pM242.重组质粒线性化后用电击法转化毕赤酵母菌株GS115.经大量筛选,获得高效分泌表达内切甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌株Gpmf25.摇瓶发酵结果表明,培养基中甘露聚糖酶的活力可达12.5IU/mL.重组酶最适pH和最适反应温度分别为5.0和80℃,在pH5.0～6.0时酶活稳定,在pH5.4时70℃保温30min酶活维持50%以上.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛爱军	中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室	14	360	11.0	14.0
2	董志扬	中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室	46	1048	16.0	31.0
3	何永志	中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室	7	353	6.0	7.0
4	乔宇	中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室	9	118	5.0	9.0
5	韦跃华	中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室	1	20	1.0	1.0