里氏木霉木聚糖酶基因(Xyn Ⅱ)在毕赤酵母中异源表达及重组蛋白酶学性质分析

• 作者: 何军 余冰 张克英 陈代文
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 里氏木霉 木聚糖酶 毕赤酵母 表达
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 920-924
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3740字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.05.029

摘要

利用RT-PCR技术从高产木聚糖酶里氏木霉(Trichoderma reesei)Rut C-30中成功地扩增出木聚糖酶基因(XynⅡ),经序列分析证实,在该菌株诱变选育过程中其成熟肽序列有2处碱基发生突变;将不带原基因信号肽的XynⅡ克隆到毕赤酵母高效表达载体pPICZaA上,线性化后经电击转化到毕赤酵母(Pichia mstoris)中,经Zeocin及PCR筛选后得到的转化子用1%甲醇诱导.SDS-PAGE证实,重组子实现了分泌表达,且发酵上清中几乎无杂蛋白;重组酶酶学性质分析表明,最适反应温度为60℃,最适反应pH值为6.0,热稳定性较好,在50℃下保温30 min仍能保留95%以上活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈代文	四川农业大学动物营养研究所教育部动物抗病营养重点开放实验室	369	4446	31.0	50.0
2	张克英	四川农业大学动物营养研究所教育部动物抗病营养重点开放实验室	259	3496	27.0	45.0
3	余冰	四川农业大学动物营养研究所教育部动物抗病营养重点开放实验室	164	1494	22.0	29.0
4	何军	四川农业大学动物营养研究所教育部动物抗病营养重点开放实验室	23	150	7.0	12.0