里氏木霉RUT-C30内切β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的分泌表达

• 作者: 丁宏标 乔宇 岳明 陈小兵
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 里氏木霉 甘露聚糖酶 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 142-146
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3949字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.01.030

摘要

以里氏木霉(Trichoderma reesei)RNA为模板,采用RT-PCR扩增的方法获得不带自身信号肽man1基因的cDNA片段.构建了重组表达载体pPIC9K-man1,重组质粒Sac Ⅰ线性化后用PEG(聚乙二醇)法导入毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株GS115中,通过PCR和表型鉴定表明,man1基因已经整合到毕赤酵母染色体上.经大量筛选,获得高效分泌表达甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌株RMAN23.将此菌株在5 L发酵罐中进行高密度发酵,测定酶活最高达470IU/mL,同时对重组甘露聚糖酶的性质进行了初步研究,重组酶的最适反应pH 4.5,最适反应温度60℃,并且在小于75℃,pH 4.0～6.0范围内有较好的稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈小兵	中国农业科学院饲料研究所	3	82	2.0	3.0
2	丁宏标	中国农业科学院饲料研究所	47	321	10.0	16.0
3	乔宇	中国农业科学院饲料研究所	29	229	8.0	14.0
4	岳明	中国农业科学院饲料研究所	5	43	4.0	5.0