猪A组轮状病毒Vp6基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 丛彦龙 刘尚高 李玉 王春凤
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 轮状病毒 Vp6基因 乳酸菌表达载体 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 遗传学和分子生物学
• 页码范围: 685-689
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3931字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2005.05.006

摘要

以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,扩增了1194bp的Vp6基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-T Vector中,构建克隆质粒pGEM-T-Vp6.用SacⅠ和KpnⅠ双酶切pGEM-T-Vp6和以胸苷酸合成酶基因(thymidylate synthase,thyA)为选择压力的非抗生素抗性的穿梭表达载体pW425t,并将纯化的Vp6基因亚克隆至表达载体pW425t中,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425t-Vp6.将pW425t-Vp6转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态E.coli X13中,经生长功能弥补筛选阳性克隆,通过SDS-PAGE分析,可见约44.88kD的融合蛋白.由Western blot分析,表明该蛋白具有与轮状病毒多克隆抗体的反应原性,从而为pW425t-Vp6在乳酸菌受体菌株中表达提供理论基础和实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉	吉林农业大学菌物研究所	419	4131	30.0	46.0
2	刘尚高	中国农业大学动物医学院	33	358	10.0	18.0
3	王春凤	吉林农业大学动物科学与技术学院	134	596	12.0	16.0
4	丛彦龙	中国农业大学动物医学院	2	14	2.0	2.0