SARS-CoV、HCoV-229E和OC43核衣壳蛋白的克隆表达及抗原相关性分析

• 作者: 丁彦青 丘立文 廖志勇 徐华 梅亚波 温坤 潘玉先 王压娣 车小燕 郝卫
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 冠状病毒 核衣壳蛋白 抗原性
• 年，卷（期）: 2005,（9）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 711-715
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4130字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2005.09.004

摘要

目的克隆表达SARS冠状病毒(SARS-CoV)和人冠状病毒(HCoV-229E、HCoV-OC43)核衣壳(N)蛋白,并对其重组蛋白的抗原相关性进行探讨.方法RT-PCR扩增SARS-CoV、HCoV-229E和HCoV-OC43的N基因全长序列,克隆到原核表达载体pQE30,IPTG诱导表达重组蛋白,用Western blot和免疫荧光鉴定.结果获得SARS-CoV、HCoV-229E和HCoV-OC43 His-N融合蛋白的相对分子质量(Mr)分别约为47×103、44×103、50×103,与相应预测值相符,Western blot和免疫荧光证实,3种融合蛋白仅与相应的免疫血清特异性结合,3种蛋白的抗原性相互间无交叉反应.结论获得具有免疫原性的SARS-CoV、HCoV-229E和HCoV-OC43的核衣壳融合蛋白,其3种N蛋白抗原性在免疫动物血清中不存在交叉反应.