青蒿花粉变应原Art a1基因的克隆、表达及特性鉴定

• 作者: 何毅华 刘志刚 吉坤美 邢苗 高波
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 青蒿花粉 重组变应原 IgE 基因克隆
• 年，卷（期）: 2005,（9）
• 所属期刊栏目: 检测技术
• 页码范围: 768-772
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3850字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2005.09.022

摘要

目的克隆、表达和鉴定青蒿花粉变应原Art al.方法在成功构建青蒿花粉cDNA文库的基础上,用蒿属花粉过敏患者的阳性混合血清进行免疫学筛选,所获阳性克隆亚克隆入pET24a(+),经IPTG诱导表达后,通过Ni2+亲和层析柱对重组变应原进行纯化,并采用Western blot和ELISA检测其IgE结合活性.结果选用阳性血清从青蒿花粉cDNA文库中筛选到1个阳性克隆,经序列测定,该基因与GenBank中已知基因无明显同源性,含有长度为609 bp的开放阅读框,编码203个氨基酸,命名为Art al;该重组变应原在大肠杆菌中高效表达为相对分子质量(Mr)为22.7×103蛋白,进一步在Ni2+亲和层析柱得到高度纯化;免疫学分析表明重组变应原有良好的IgE结合活性.结论本研究克隆和鉴定了一个青蒿花粉主要变应原Art al(登录号为:CK700713),为花粉过敏性疾病的诊断和免疫治疗及进一步的实验研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吉坤美		4	56	4.0	4.0