含脂氧素A4受体同源基因真核表达载体的构建与转染系膜细胞

• 作者: 吴升华 周国平 董玲 陆超 陈子庆
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 脂氧素A4受体同源基因 真核表达载体 克隆 转染 系膜细胞
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 93-96
• 页数: 4页
• 分类号: Q782|R392.11
• 字数: 2460字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2005.02.001

摘要

目的:构建小鼠脂氧素A4受体同源基因(LRHG)的真核表达载体,克隆后转染小鼠肾小球系膜细胞,观察LRHG编码的脂氧素A4受体样蛋白(LRLP)在系膜细胞中的表达.方法:应用PCR方法,以小鼠睾丸cDNA为模板,扩增出LRHG基因片段,插入质粒pGEM-T中,转化入大肠杆菌JM109.扩增阳性重组质粒,经酶切后纯化并测序鉴定目的片段.构建含6×组氨酸(His)基因的真核表达载体pcDNA3.1/LRHG-his,转化入大肠杆菌JM109扩增,酶切后再测序鉴定目的片段,抽提质粒后转染系膜细胞,进行Western blot鉴定LRLP的表达.结果:测序鉴定表明,克隆的LRHG序列与GenBank中LRHG原序列100%符合,应用抗6×His抗体进行Western blot鉴定系膜细胞中有LR-LP的表达.结论:成功地构建了真核表达载体pcDNA3.1/LRHG-his,并转染了肾小球系膜细胞,获得了稳定的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴升华	南京医科大学第一附属医院儿科	83	667	9.0	23.0
2	周国平	南京医科大学第一附属医院儿科	59	173	7.0	9.0
3	陆超	南京医科大学第一附属医院儿科	69	226	7.0	9.0
4	董玲	南京医科大学第一附属医院儿科	35	168	7.0	10.0
5	陈子庆	南京医科大学第一附属医院中心实验室	24	302	8.0	17.0