猪带绦虫TSO18基因真核表达载体的构建及其表达

• 作者: 才学鹏 景志忠 袁改玲 郑亚东 郭爱疆 骆学农
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 猪带绦虫 TSO18基因 毕赤酵母 诱导表达
• 年，卷（期）: 2005,（7）
• 所属期刊栏目: 寄生虫学
• 页码范围: 529-532
• 页数: 4页
• 分类号: S852.734|Q782
• 字数: 3674字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2005.07.008

摘要

采用PCR从重组克隆载体pGEM-TSO18中扩增出猪带绦虫六钩蚴TSO18基因,与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9k相连接,构建重组表达载体pPIC9k-TSO18,转化大肠埃希氏菌JM109,经测序证实,基因序列完全正确.制备重组质粒pPIC9k-TSO18,用SalⅠ线性化,并电转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,使重组表达载体与酵母染色体发生同源整合.采用G418抗性梯度法筛选得到高拷贝重组菌株,以甲醇进行诱导表达,SDS-PAGE和Western-blotting分析结果表明,诱导表达的培养上清中表达出具有反应活性的16ku重组蛋白,目的蛋白约占培养上清液中蛋白总量的80%以上,诱导72h目的蛋白表达量为0.5mg/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	景志忠	中国农业科学院兰州兽医研究所	81	458	12.0	18.0
2	骆学农	中国农业科学院兰州兽医研究所	38	174	9.0	12.0
3	才学鹏	中国农业科学院兰州兽医研究所	141	790	15.0	21.0
4	袁改玲	中国农业科学院兰州兽医研究所	5	46	4.0	5.0
5	郑亚东	中国农业科学院兰州兽医研究所	15	114	7.0	10.0
6	郭爱疆	中国农业科学院兰州兽医研究所	7	38	3.0	6.0